Home Others Dyes Inibitore D-Luciferin

solo per uso di ricerca

D-Luciferin Dyes Inibitore

N. Cat.: S7763

D-Luciferin è un substrato bioluminescente popolare della luciferasi in presenza di ATP, utilizzato nelle applicazioni di imaging bioluminescente basate sulla luciferasi e di screening ad alto rendimento basate su cellule. In un modello murino immunocompetente di cancro ovarico, l'uso di questo composto e della luciferasi della lucciola preserva le interazioni immunitarie ospite-tumore poiché l'imaging bioluminescente è un'indicazione più sensibile della crescita tumorale rispetto all'aumento di peso.
D-Luciferin Dyes Inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 280.32

Vai a

Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.48%
99.48

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dell'attività PMID
CHO cells Function assay Displacement of [3H]PSB-13253 from human recombinant GPR35 exprssed in CHO cells by liquid scintillation counting analysis, Ki=9.86 μM 23888932
HT29 cells  Function assay Agonist activity at human GPR35 expressed in human HT29 cells by DMR assay, EC50=12.9 μM 23888932
Clicca per visualizzare più dati sperimentali sulle linee cellulari

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 280.32 Formula

C11H8N2O3S2

 Conservazione (Dalla data di ricezione) 3 years -20°C(in the dark) powder
N. CAS 2591-17-5 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi Firefly luciferin, Beetle Luciferin Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)O

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 26 mg/mL (92.75 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

In vitro

1.Esempio di protocollo per saggi di imaging bioluminescente in vitro
a) Preparare una soluzione madre di Luciferin 100 mM (100-200X) in acqua sterile. Mescolare bene. Usare immediatamente, o preparare aliquote monouso e conservare a -20℃, evitare cicli di congelamento-scongelamento, evitare l'esposizione alla luce.
b) Preparare una soluzione di lavoro di D-Luciferin 0,5-1 mM in terreno di coltura tissutale preriscaldato.
c) Aspirare il terreno dalle cellule in coltura.
d) Aggiungere questa soluzione di lavoro composta alle cellule e incubare le cellule per 5-10 minuti a 37℃ appena prima dell'imaging.
2.Esempio di protocollo per saggi di imaging bioluminescente in vivo
a) Preparare una soluzione madre di Luciferin 15 mg/mL in DPBS, senza Mg2+ e Ca2+. Mescolare bene.
b) Sterilizzare la soluzione per filtrazione attraverso un filtro da 0,2 µm. Usare immediatamente, o preparare aliquote monouso e conservare a -20℃, evitare cicli di congelamento-scongelamento, evitare l'esposizione alla luce.
c) Iniettare la luciferina per via intra-peritoneale (i.p.) 10-15 minuti prima dell'imaging a 150 mg/kg (o 10 µL/g di questa soluzione madre chimica) del peso corporeo dell'animale.
Nota: Uno studio cinetico della luciferina dovrebbe essere eseguito per ogni modello animale per determinare il tempo di picco del segnale.
3.Esempio di protocollo per saggi reporter di luciferina
a) Preparare una soluzione madre di Luciferin 100 mM in acqua sterile. Usare immediatamente, o preparare aliquote monouso e conservare a -20℃, evitare cicli di congelamento-scongelamento, evitare l'esposizione alla luce.
b) Preparare una soluzione di lavoro di questo composto 1 mM con 3 mM ATP, 1 mM DTT e 15 mM MgSO4 in tampone tricina 25 mM pH 7,8.
c) Pipettare 5-10 µL di lisato cellulare in una micropiastra. Utilizzare reagente di lisi o tampone senza lisato come bianco.
d) Preparare il luminometro con questa soluzione di lavoro chimica.
e) Iniettare 200 µL di questa soluzione di lavoro composta senza ritardo e con un tempo di integrazione di 10 secondi.
In vivo

In un modello murino immunocompetente di cancro ovarico, l'uso del substrato D-Luciferin e della luciferasi di lucciola preserva le interazioni immunitarie tumore-ospite, poiché l'imaging bioluminescente è un'indicazione più sensibile della crescita tumorale rispetto all'aumento di peso.

Riferimenti