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CPI-613 (Devimistat) Inibitore del metabolismo mitocondriale

N. Cat.S2776

Devimistat (CPI-613), un analogo del lipoato, inibisce gli enzimi mitocondriali piruvato deidrogenasi (PDH) e α-chetoglutarato deidrogenasi nella linea cellulare NCI-H460, interrompendo il metabolismo mitocondriale delle cellule tumorali. CPI-613 induce apoptosis nelle cellule di cancro pancreatico. Fase 2.
CPI-613 (Devimistat) Dehydrogenase Inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 388.59

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.03%
99.03

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dell'attività PMID
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 388.59 Formula

C22H28O2S2

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 95809-78-2 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles C1=CC=C(C=C1)CSCCC(CCCCC(=O)O)SCC2=CC=CC=C2

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 77 mg/mL (198.15 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 77 mg/mL

Water : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PDH
(NCI-H460 cells)
α-ketoglutarate dehydrogenase
(NCI-H460 cells)
In vitro

Devimistat (CPI-613) produce tossicità selettiva in vitro contro diverse linee cellulari tumorali, incluse cellule di cancro del polmone umano H460 e cellule di sarcoma umano Saos-2, con valori di EC50 di 120 μM e 120 μM, rispettivamente. Interrompe il metabolismo mitocondriale delle cellule tumorali H460, inclusa l'inibizione dell'attività del complesso PDH e la perdita del potenziale di membrana mitocondriale in modo tempo- e dose-dipendente dal farmaco. Inoltre, questo composto (240 μM) induce anche la morte cellulare apoptotica e non apoptotica nelle cellule di cancro del polmone umano H460 e nelle cellule di sarcoma umano Saos-2.

Saggio chinasico
Fosforilazione di E1α
Le cellule vengono seminate e coltivate durante la notte. Cinque piastre per gruppo di test vengono trattate con Devimistat (CPI-613) o solvente. Le cellule vengono lisate in situ con 150 μL di tampone di lisi A [455 μL di solubilizzatore di proteine Zoom 2D 1, 2,5 μL di Tris base 1M, 5 μL di cocktail inibitore di proteasi 100X; 5 μL di DTT 2M] e i lisati di tutte le cinque piastre vengono raggruppati in una provetta da microcentrifuga da 1,5 mL e sonicati su ghiaccio per 15 passaggi al 50% di potenza. Dopo un'incubazione di 10 minuti a temperatura ambiente, vengono aggiunti 2,5 μL di dimetilacrilamide (DMA) e i lisati vengono incubati per altri 10 minuti. Vengono aggiunti 5 μL di DTT 2M per neutralizzare l'eccesso di DMA. I lisati vengono centrifugati per 15 minuti e il supernatante viene recuperato. Quindi, 40 μL di lisato vengono miscelati con 0,8 μL di anfoliti pH 3-10, 0,75 μL di DTT 2M e portati a 150 μL con solubilizzatore di proteine Zoom 2D 1. Vengono caricati 150 μL di campione nell'IPG runner e vengono aggiunte strisce IPG pH 3-10NL. Le strisce vengono immerse durante la notte a temperatura ambiente. Viene utilizzato un protocollo a gradini per la focalizzazione isoelettrica (250V, 20min.; 450V 15min; 750V 15min 2000V 30 minuti). Per la seconda dimensione, le strisce vengono trattate per 15 minuti in tampone di carico 1X, seguite da 15 minuti in tampone di carico 1X più 160 mM di acido iodoacetico. Le strisce vengono sottoposte a elettroforesi su gel NuPAGE 4-12% Bis Tris ZOOM. Le proteine vengono trasferite su membrane PVDF da 4,5 μm. Le serine 232, 293 e 300 sono bersagli dei tre eventi di fosforilazione PDK ben caratterizzati che controllano l'attività di E1. Quantità uguali di proteine da cellule trattate e trattate con placebo vengono caricate su gel e i Western blot vengono sondati con anticorpo anti-E1α come controllo di corrispondenza interno o uno dei tre anticorpi anti-fosfo-E1α.
In vivo

Devimistat (CPI-613) ha una potente attività antitumorale in un modello di xenotrapianto tumorale umano di una cellula tumorale pancreatica (BxPC-3) a 25 mg/kg. Allo stesso modo, questo composto (10 mg/kg) produce anche una significativa inibizione della crescita tumorale del carcinoma polmonare non a piccole cellule umano H460 in un modello murino. Inoltre, produce poca o nessuna tossicità da effetti collaterali nei range di dose terapeutici attesi in modelli animali di grandi dimensioni e ha la dose massima tollerata di 100 mg/kg nei topi.

Riferimenti

Applicazioni (Applications)

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Western blot pE1α p-AMPK / AMPK
S2776-WB1
25165100

Informazioni sullo studio clinico (Clinical Trial Information)

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT Reclutamento Condizioni Sponsor/Collaboratori Data di inizio Fasi
NCT05926206 Withdrawn
Metastatic Pancreatic Adenocarcinoma
University of Michigan Rogel Cancer Center
 July 2023 Phase 1|Phase 2
NCT03793140 Active not recruiting
Lymphoma|Leukemia
Memorial Sloan Kettering Cancer Center|City of Hope Medical Center|Massachusetts General Hospital|M.D. Anderson Cancer Center|George Washington University
 December 31 2018 Phase 2

Domande Frequenti (Frequently Asked Questions)

Domanda 1:
How to dissolve it for in vivo applications?

Risposta:
It is a suspension in 1% DMSO+30% polyethylene glycol+1% Tween 80 at 30mg/ml, and is for oral gavage.