Home Immunology & Inflammation Immunology & Inflammation related Chimico Cl-amidine

solo per uso di ricerca

Cl-amidine inibitore PAD

N. Cat.S8141

Cl-amidine un inibitore irreversibile della pan-peptidilarginina deiminasi (PAD) con valori di IC50 di 5,9 0,3 M, 0,8 0,3 M e 6,2 1,0 M rispettivamente per PAD4, PAD1 e PAD3. Cl-amidine induce apoptosi.
Cl-amidine Immunology & Inflammation related Chimico Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 424.8

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.89%
99.89

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dell'attività PMID
MDA-MB-231 Cytotoxicity assay 400 uM 96 hrs Cytotoxicity against human MDA-MB-231 cells assessed as decrease in cell number at 400 uM after 96 hrs by trypan blue assay 23420624
MDA-MB-231 Cytotoxicity assay 200 to 400 uM 96 hrs Cytotoxicity against human MDA-MB-231 cells assessed as decrease in cell viability at 200 to 400 uM after 96 hrs by trypan blue assay 23420624
HL60 Function assay 5 to 10 uM 15 mins Inhibition of PAD4 in human HL60 cells assessed as reduction in A23187-induced citrullinated H4 level at 5 to 10 uM preincubated for 15 mins followed by A23187 addition measured after 15 mins by Western blot analysis 30344909
HEK293T Function assay 10 nM to 100 uM Inhibition of human recombinant PAD3 expressed in HEK293T cells assessed as conversion of BAEE to sodium benzoyl-L-citrulline at 10 nM to 100 uM by colorimetric analysis ChEMBL
HEK293T Function assay 100 uM 24 hrs Inhibition of thapsigargin-induced cell death in human HEK293T cells overexpressing human recombinant PAD3 assessed as increase in cell survival at 100 uM treated 15 mins prior to thapsigargin addition measured after 24 hrs drug treatment by methylene blu ChEMBL
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 424.8 Formula

C14H19ClN4O2.C2HF3O2

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 1043444-18-3 -- Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles C1=CC=C(C=C1)C(=O)NC(CCCN=C(CCl)N)C(=O)N.C(=O)(C(F)(F)F)O

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 84 mg/mL (197.74 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Ethanol : 84 mg/mL

Water : 35 mg/mL (Ultrasonic and heating.)

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PAD1
(Cell-free assay)
0.8 μM
PAD4
(Cell-free assay)
5.9 μM
PAD3
(Cell-free assay)
6.2 μM
In vitro
Cl-amidine antagonizza l'aumento mediato da PAD4 dell'interazione p300GBD-GRIP1 in modo dose-dipendente. L'effetto inibitorio di questo composto non aspecifico ma mirato all'enzima PAD4 attivo. Questo composto aumenta l'espressione di p53 nelle cellule immunitarie positive al CD45. Innesca la differenziazione e l'apoptosi di molteplici linee cellulari tumorali che sono p53+/+ e p53 (ad esempio, cellule HL60, HT29, TK6 e U2-OS). Questa sostanza chimica induce l'espressione di p53 e di diversi geni bersaglio a valle, tra cui l'inibitore della chinasi ciclina-dipendente p21, GADD45 e la proteina pro-apoptotica PUMA nelle cellule di osteosarcoma U2-OS.
In vivo
Il trattamento con Cl-amidine inibisce la formazione di NET (trappola extracellulare di neutrofili) di NZM (New Zealand mixed 2328) in vivo e altera significativamente i profili degli autoanticorpi circolanti e i livelli di complemento, riducendo al contempo il deposito glomerulare di IgG. Inoltre, questo composto aumenta la capacit di differenziazione delle cellule progenitrici endoteliali del midollo osseo, migliora la vasorilassamento endotelio-dipendente e ritarda notevolmente il tempo alla trombosi arteriosa indotta da lesione fotochimica. Ritarda lo sviluppo della trombosi nei topi NZM. Questa sostanza chimica inibisce i PAD nei topi senza tossicit significativa e migliora i fenotipi della malattia in modelli animali di artrite infiammatoria e malattia infiammatoria intestinale. Ed dimostrato che riduce la gravit della malattia nei modelli murini di colite ulcerosa e AR.
Riferimenti
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21415415/

Applicazioni (Applications)

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Western blot PAD4 / H3R17Me / H3Cit / p21 / p53 / p-p53 iNOS MMP-2 / MMP-9 p-Elk-1 / Elk-1
S8141-WB1
18505818