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CFSE (CFDA-SE) Cell Proliferation &Tracking Dye

N. Cat.: S8269

Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester) is a fluorescent cell staining dye. CFSE is frequently used in cell proliferation assay and motility assays. CFSE is cell permeable and covalently couples, via its succinimidyl group, to intracellular molecules, notably, to intracellular lysine residues and other amine sources.
CFSE (CFDA-SE) Dyes chemical Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 557.46

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.85%
99.85

Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 557.46 Formula

C29H19NO11

Conservazione (Dalla data di ricezione) 3 years -20°C(in the dark) powder
N. CAS 150347-59-4 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi Carboxyfluorescein succinimidyl ester, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester Smiles CC(=O)OC1=CC=C2C(=C1)OC3=C(C=CC(=C3)OC(C)=O)C24OC(=O)C5=CC(=CC=C45)C(=O)ON6C(=O)CCC6=O.CC(=O)OC7=CC=C8C(=C7)OC9=C(C=CC(=C9)OC(C)=O)C8%10OC(=O)C%11=CC=C(C=C%10%11)C(=O)ON%12C(=O)CCC%12=O

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 100 mg/mL (179.38 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

In vitro

Preparazione della soluzione di lavoro di CFDA-SE
1.1 Preparazione della soluzione stock
Sciogliere 1 mg di CFDA-SE in 0,1794 mL di DMSO per ottenere 10 mM di CFSE.
Nota: Si raccomanda di conservare la soluzione stock a -20 ℃ o -80 ℃ al riparo dalla luce ed evitare cicli ripetitivi di congelamento-scongelamento.
1.2 Preparazione di questa soluzione di lavoro chimica
Diluire la soluzione stock in terreno di coltura cellulare privo di siero o PBS per ottenere 5-10 μM di questa soluzione di lavoro chimica.
Nota: Si prega di regolare la concentrazione di questa soluzione di lavoro chimica in base alla situazione reale.
Colorazione cellulare
2.1 Per le cellule in sospensione: Centrifugare a 1000 g a 4℃ per 3-5 minuti e quindi scartare il surnatante. Lavare due volte con PBS, 5 minuti ogni volta.
Per le cellule aderenti: Scartare il terreno di coltura cellulare e aggiungere tripsina per dissociare le cellule e formare una sospensione monocellulare. Centrifugare a 1000 g a 4℃ per 3-5 minuti e quindi scartare il surnatante. Lavare due volte con PBS, 5 minuti ogni volta.
2.2 Aggiungere 1 mL di questa soluzione di lavoro chimica, quindi incubare a temperatura ambiente per 30 minuti.
2.3 Centrifugare a 400 g a 4℃ per 3-4 minuti e quindi scartare il surnatante.
2.4 Lavare due volte con PBS, 5 minuti ogni volta.
2.5 Risospendere le cellule con terreno di coltura cellulare privo di siero o PBS, quindi rilevare con microscopio a fluorescenza o citometro a flusso.

In vivo

La marcatura in vivo delle cellule con CFSE è fattibile praticamente senza alcun effetto tossico sulle cellule marcate o adiacenti. Presenta vantaggi in studi di migrazione a lungo termine, come dimostrato dal recupero di cellule T negli organi linfoidi periferici.

Riferimenti

Informazioni sullo studio clinico (Clinical Trial Information)

(dati da https://clinicaltrials.gov, aggiornato il 2024-05-22)

Numero NCT Reclutamento Condizioni Sponsor/Collaboratori Data di inizio Fasi
NCT02028403 Completed
HIV Infections
National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)
June 2014 Phase 1
NCT01376726 Completed
HIV Infections
National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)|Novartis Vaccines and Diagnostics Inc
July 2011 Phase 1
NCT01029548 Completed
HIV Infections
Barbara Ensoli MD|Istituto Superiore di Sanità
April 2008 --
NCT01024556 Completed
HIV Infection
Barbara Ensoli MD|Istituto Superiore di Sanità
March 2008 --