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U0126-EtOH inibitore di MEK1/2

N. Cat.: S1102

U0126-EtOH è un inibitore altamente selettivo di MEK1/2 con IC50 di 0,07 μM/0,06 μM in saggi senza cellule, affinità 100 volte superiore per ΔN3-S218E/S222D MEK rispetto a PD98059. U0126 inibisce l'autophagy e la mitophagy con attività antivirale.
U0126-EtOH MEK Inibitore Chemical Structure

Struttura chimica

Peso molecolare: 426.56

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Controllo Qualità (Quality Control)

Lotto: Purezza: 99.98%
99.98

Prodotti spesso usati con U0126-EtOH

SP600125

It and SP600125 reverse several genes upregulation in RAW264.7 and Ana-1 cells caused by Echinococcus multilocularis soluble antigen.

SB203580 (Adezmapimod)

It and Adezmapimod ameliorate indoxyl sulfate-induced inhibitory effects and reductions in Kv4.2, Kv4.3, and KChIP2 proteins and genes.

Purmorphamine

In the presence of Purmorphamine, it inhibits sonic hedgehog-induced levels of p-ERK1/2 in RA-FLSs.

Coltura cellulare, trattamento e concentrazione di lavoro
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Linee cellulari Tipo di saggio Concentrazione Tempo di incubazione Formulazione Descrizione dell'attività PMID
rat PC12 cells Function assay 10 μM 1 h Activation of Nrf2/ARE in rat PC12 cells assessed as HO-1 protein induction at 10 uM after 5 hrs pretreated with JNK inhibitor SP600125 for 1 hr before compound addition by Western blot analysis 21345685
mouse RAS-3T3 cells Function assay 10-40 μM Inhibition of MEK-mediated ERK1/2 phosphorylation in mouse RAS-3T3 cells at 10 to 40 uM by ELISA. 24507826
HCT116 cells Function assay Ability of compound to inhibit anchorage independent colony formation (soft agar growth assay) in HCT116 cells, IC50=19.4 μM. 15225706
COS-7 cells Function assay Inhibitory concentration against AP-1 transcription in COS-7 cells， IC50=1 μM. 15006386
HeLa cells Function assay Inhibition of EGF-stimulated Elk1-luciferase reporter assay in HeLa cells, IC50=0.29 μM. 15225706
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Informazioni chimiche, conservazione e stabilità (Chemical Information, Storage & Stability)

Peso molecolare 426.56 Formula

C18H16N6S2.C2H6O

 Conservazione (Dalla data di ricezione)
N. CAS 1173097-76-1 Scarica SDF Conservazione delle soluzioni stock

Sinonimi N/A Smiles CCO.C1=CC=C(C(=C1)N)SC(=C(C#N)C(=C(N)SC2=CC=CC=C2N)C#N)N

Solubilità (Solubility)

In vitro
Lotto:

DMSO : 85 mg/mL (199.26 mM)
(Il DMSO contaminato da umidità può ridurre la solubilità. Utilizzare DMSO fresco e anidro.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calcolatore di Molarità

Massa Concentrazione Volume Peso molecolare
Calcolatore di Diluizione Calcolatore del Peso Molecolare

In vivo
Lotto:

Calcolatore di formulazione in vivo (Soluzione chiara)

Passo 1: Inserire le informazioni di seguito (Consigliato: Un animale aggiuntivo per tenere conto della perdita durante l'esperimento)

mg/kg g μL

Passo 2: Inserire la formulazione in vivo (Questo è solo il calcolatore, non la formulazione. Contattateci prima se non c'è una formulazione in vivo nella sezione Solubilità.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Risultati del calcolo:

Concentrazione di lavoro: mg/ml;

Metodo per preparare il liquido master di DMSO: mg farmaco predissolto in μL DMSO ( Concentrazione del liquido master mg/mL, Vi preghiamo di contattarci prima se la concentrazione supera la solubilità del DMSO del lotto del farmaco. )

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungereμL PEG300, mescolare e chiarire, quindi aggiungereμL Tween 80, mescolare e chiarire, quindi aggiungere μL ddH2O, mescolare e chiarire.

Metodo per preparare la formulazione in vivo: Prendere μL DMSO liquido master, quindi aggiungere μL Olio di mais, mescolare e chiarire.

Nota: 1. Si prega di assicurarsi che il liquido sia limpido prima di aggiungere il solvente successivo.
2. Assicurarsi di aggiungere il/i solvente/i in ordine. È necessario assicurarsi che la soluzione ottenuta, nell'aggiunta precedente, sia una soluzione limpida prima di procedere all'aggiunta del solvente successivo. Metodi fisici come il vortex, gli ultrasuoni o il bagno d'acqua calda possono essere utilizzati per facilitare la dissoluzione.

Meccanismo d'azione (Mechanism of Action)

Caratteristiche
A chemically synthesized and highly selective inhibitor of both MEK1 and MEK2.
Targets/IC50/Ki
MEK2
(Cell-free assay)
0.06 μM
MEK1
(Cell-free assay)
0.07 μM
In vitro

U0126-EtOH antagonizza funzionalmente l'attività trascrizionale di AP-1 e blocca la produzione di una varietà di citochine e metalloproteinasi coinvolte nella risposta infiammatoria. Questo composto inibisce la proliferazione delle cellule T in risposta a stimolazione antigenica o a anti-CD3 più anti-CD28 Abs cross-linked senza effetto sulla proliferazione indotta da IL-2, mediante la down-regolazione dei livelli di mRNA di IL-2. Uno studio recente mostra che questa sostanza chimica antagonizza l'apoptosi indotta dal resveratrolo nelle cellule C4-2 di cancro alla prostata umano resistente alla castrazione, inibisce la funzione mitocondriale e sposta le cellule verso la glicolisi aerobica indipendentemente da MEK.

Saggio chinasico
Saggi chinasici in vitro
La quantità di MEK di tipo selvatico immunoprecipitata utilizzata in questi saggi viene aggiustata per ottenere una quantità simile di unità di attività a quella ottenuta con 10 nM di MEK ricombinante. Le velocità di reazione sono misurate utilizzando un apparato di filtraggio su nitrocellulosa a 96 pozzetti come descritto di seguito. Salvo diversa indicazione, le reazioni vengono condotte a una concentrazione enzimatica di 10 nM, in 20 mM Hepes, 10 mM MgCl2, 5 mM β-mercaptoetanolo, 0,1 mg/mL BSA, pH 7,4, a temperatura ambiente. Le reazioni vengono avviate con l'aggiunta di [γ-33P]ATP nella miscela di reazione premiscelata MEK/ERK/questo composto, e un'aliquota di 100 μL viene prelevata ogni 6 minuti e trasferita alla piastra a membrana di nitrocellulosa a 96 pozzetti che contiene 50 mM di EDTA per arrestare la reazione. La piastra a membrana viene aspirata e lavata 4 volte con tampone sotto vuoto. I pozzetti vengono quindi riempiti con 30 μL di liquido di scintillazione Microscint-20, e la radioattività dell'ERK fosforilato con 33P viene contata con un contatore a scintillazione Top Count. Le velocità sono ottenute dalle pendenze dei grafici di radioattività rispetto al tempo. Le concentrazioni di ERK e ATP sono rispettivamente 400 nM e 40 μM, salvo diversa indicazione. Per tutti i saggi enzimatici in vitro, la percentuale di inibizione è calcolata 100 (1 −Vi/Vo) dove Vi e Vo sono le velocità di reazione iniziali in presenza e in assenza di questo prodotto chimico, rispettivamente. I dati vengono quindi rappresentati graficamente come percentuale di inibizione in funzione della concentrazione di questo composto e adattati, mediante regressione non lineare dei minimi quadrati, all'equazione standard per un'isoterma di Langmuir per determinare l'IC50. Come riportato, le concentrazioni enzimatiche sono basate sui pesi molecolari e sulla massa di proteine utilizzate nel volume finale del saggio e non sulla titolazione del sito attivo. Pertanto, la concentrazione effettiva del sito attivo dell'enzima può differire da quella riportata.
In vivo

U0126-EtOH, come inibitore della via di segnalazione intracellulare Raf/MEK/ERK, dimostra attività antivirale sopprimendo la propagazione della variante pandemica del 2009 dell'IV H1N1 e dei virus dell'influenza aviaria altamente patogeni (HPAIV) in vivo nel polmone di topo mediante inibizione. Questo composto mostra un potenziale effetto neuroprotettivo e migliora l'apprendimento spaziale nel labirinto acquatico di Morris (MWM) attivando il coattivatore gamma del recettore attivato dai proliferatori di perossisomi-1a, il fattore respiratorio nucleare 1 e il fattore di trascrizione mitocondriale A nei ratti iniettati con Aβ.

Riferimenti
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21854809/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22510382/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9660836/

Applicazioni (Applications)

Metodi Biomarcatori Immagini PMID
Western blot p-MEK / MEK / p-ERK / ERK E-cadherin / Vimentin / Twist-2
S1102-WB1
27487136
Immunofluorescence pERK / pPPARγ E-cadherin / Vimentin CD40
S1102-IF1
27145370

Domande Frequenti (Frequently Asked Questions)

Domanda 1:
I want to know whether it is light-sensitive?

Risposta:
It is not stable. It should be stored as powder at -20°C, and prepared the solution just before use.