uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

D-Luciferin Potassium Salt Dyes remmer

Cat.Nr.S6580

D-luciferine is het natuurlijke substraat van het enzym luciferase (Luc), dat de productie katalyseert van het typische geelgroene licht van vuurvliegjes. De 560 nm chemiluminescentie van deze reactie piekt binnen enkele seconden, met een lichtopbrengst die evenredig is met de luciferaseconcentratie wanneer het substraat luciferine in overmaat aanwezig is. Het luciferase (luc) gen is een populair reportergen voor onderzoek en screenings. Chemiluminescente technieken zijn vrijwel achtergrondvrij, waardoor het luc reportergen ideaal is voor het detecteren van lage genexpressie. Naast zijn rol als reporter van genexpressie, wordt luciferase vaak gebruikt in een extreem gevoelige test voor ATP.
D-Luciferin Potassium Salt Dyes remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 318.41

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.97%
99.97

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht 318.41 Formule

C11H7KN2O3S2

Opslag (Vanaf de ontvangstdatum) 3 years -20°C(in the dark) powder
CAS-nr. 115144-35-9 -- Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)[O-].[K+]

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

Water : 39 mg/mL

DMSO : 5 mg/mL (15.7 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

In vitro

1.Voorbeeldprotocol voor in vitro bioluminescente beeldvormingsassays
a) Bereid een 100 mM (100-200X) Luciferine stockoplossing in steriel water. Goed mengen. Onmiddellijk gebruiken, of aliquots voor eenmalig gebruik maken en bewaren bij -20℃, vermijd vries-dooi cycli, vermijd blootstelling aan licht.
b) Bereid een 0,5-1 mM werkoplossing van D-Luciferine in voorgewarmd weefselkweekmedium.
c) Aspirereer medium van gekweekte cellen.
d) Voeg Luciferine werkoplossing toe aan cellen en incubeer de cellen gedurende 5-10 minuten bij 37℃ vlak voor het beeldvormen.
2.Voorbeeldprotocol voor in vivo bioluminescente beeldvormingsassays
a) Bereid een 15 mg/mL Luciferine stockoplossing in DPBS, zonder Mg2+ en Ca2+. Goed mengen.
b) Filter steriliseert de oplossing door een 0,2 m filter. Onmiddellijk gebruiken, of aliquots voor eenmalig gebruik maken en bewaren bij -20℃, vermijd vries-dooi cycli, vermijd blootstelling aan licht.
c) Injecteer de luciferine intra-peritoneaal (i.p.) 10-15 minuten voor beeldvorming met 150 mg/kg (of 10 L/g luciferine stockoplossing) van het lichaamsgewicht van het dier.
Opmerking: Een kinetische studie van luciferine moet worden uitgevoerd voor elk dierenmodel om de piek signaaltijd te bepalen.
3.Voorbeeldprotocol voor luciferine reporter assays
a) Bereid een 100 mM Luciferine stockoplossing in steriel water. Onmiddellijk gebruiken, of aliquots voor eenmalig gebruik maken en bewaren bij -20℃, vermijd vries-dooi cycli, vermijd blootstelling aan licht.
b) Bereid een 1 mM werkoplossing van D-Luciferine met 3 mM ATP, 1 mM DTT en 15 mM MgSO4 in 25 mM tricinebuffer pH 7.8.
c) Pipetteer 5-10 L cellysaat in een microplaat. Gebruik lyseerreagens of buffer zonder lysaat als blanco.
d) Prime luminometer met luciferine werkoplossing.
e) Injecteer 200 L luciferine werkoplossing zonder vertraging en een integratietijd van 10 seconden.

Referenties

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

Gelieve uw naam in te voeren.
Gelieve uw e-mailadres in te voeren. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.